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螺旋藻粉中β-胡蘿卜素檢測方法的標準化研究

發(fā)表時間:2025-08-22

螺旋藻粉中β-胡蘿卜素檢測方法的標準化對于準確評估螺旋藻產(chǎn)品質量至關重要。目前,常見的檢測方法包括高效液相色譜法、超高效合相色譜法、分光光度法等,以下是對這些方法的詳細介紹:

高效液相色譜法(HPLC):該方法是目前測定螺旋藻粉β-胡蘿卜素較為常用的方法之一,例如,采用RP-HPLC法,以Hypersil ODS-2 C18柱為分離柱,甲醇-乙腈(90:10V/V)為流動相,流速1.2mL/min,柱溫30℃,檢測波長 448nm。此方法下β-胡蘿卜素對照品進樣量在0.517-4.653μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關系,平均加樣回收率為98.03%RSD0.94%。該方法準確可靠、重復性好,能有效分離β-胡蘿卜素與其他成分,為螺旋藻制劑質量標準的制定提供了科學依據(jù)。

超高效合相色譜法(UPC2):這是一種新興的檢測方法,具有快速、準確的特點。以二氯甲烷 - 乙醇(2:1)為提取溶劑,樣品過0.22μm CHP濾膜后,采用 CO-甲醇梯度洗脫,經(jīng)ACQUITY UPC2 HSS C18 SB150mm×3.0mm1.8μm)色譜柱分離,色譜柱溫為40℃,背壓為 2000psi,外標法定量。3種類胡蘿卜素(包括β-胡蘿卜素)在一定濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關系,相關系數(shù)均不小于0.9993,方法檢出限為0.012-0.035mg/g,定量下限為0.040-0.120mg/g,加標回收率為82.5%-95.7%,相對標準偏差為7.6%-9.8%。

分光光度法:分光光度法也可用于螺旋藻粉中 β- 胡蘿卜素的測定。通過優(yōu)化提取工藝,確定適宜的提取劑為正庚烷:丙酮:無水乙醇:甲苯=10:7:6:7,提取劑體積為30mL,浸提時間為12h,浸提溫度為35℃。在該工藝下測得螺旋藻藻粉的β-胡蘿卜素含量為134.15mg/100g。此外,也有研究采用石油醚提取過氧化鋁柱的方法,排除其它成分的干擾,在 450nm 處測定吸收度,該方法具有線性關系好、穩(wěn)定、靈敏、簡便的優(yōu)點。

為實現(xiàn)檢測方法的標準化,需要對各種方法的操作步驟、儀器參數(shù)、試劑純度等進行嚴格規(guī)范和統(tǒng)一。同時,還應進行方法學驗證,包括線性范圍、精密度、準確度、檢出限和定量限等指標的驗證,以確保不同實驗室之間檢測結果的可比性和準確性。

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